【設(shè)備更新系列】等溫滴定量熱儀（ITC）篇

更新時間：2024-08-14 點擊次數(shù)：770

大規(guī)模設(shè)備更新的方案正在穩(wěn)步推行中，您的實驗室是否考慮新增或更新一臺分子互作分析儀器？

被數(shù)萬篇科學(xué)論文的引用的等溫滴定微量熱儀，被業(yè)內(nèi)認(rèn)為分子間相互作用分析的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，可以用來交叉驗證多種基于表面的生物長安其互作技術(shù)和熒光互作技術(shù)。這里為您簡單介紹一下ITC的主要應(yīng)用，供您參考。

等溫滴定量熱儀（ITC）通過非標(biāo)記的、直接測定分子間相互作用過程中因非共價鍵重組所吸收和釋放的能量，在一次實驗中即可直接測定全套熱力學(xué)參數(shù)，如親和力、結(jié)合特異性、化學(xué)計量比、焓變、熵變以及吉布斯自由能變化等信息，為研究各類生物分子間相互作用提供全面而深入的視角。

等溫滴定量熱儀無需對樣品進行任何標(biāo)記、無需芯片固定和修飾，也無需再生步驟，無分子量大小和樣品種類限制、是真正的無標(biāo)記的溶液內(nèi)互作技術(shù)，被業(yè)內(nèi)認(rèn)為分子間相互作用分析的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，可以用來交叉驗證多種基于表面的生物傳感器互作技術(shù)和熒光互作技術(shù)。數(shù)萬篇科學(xué)論文的引用，是您與數(shù)萬用戶共同的選擇。選擇MicroCal ITC系列產(chǎn)品，顯著提高研究數(shù)據(jù)的可靠性，并確保文獻實驗結(jié)果的可重現(xiàn)性。

PEAQ ITC (左），PEAQ-ITC Automated（右）

典型應(yīng)用

藥物設(shè)計-先導(dǎo)化合物優(yōu)化

結(jié)合虛擬分子模擬和晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，ITC技術(shù)可以幫助開發(fā)者設(shè)計和優(yōu)化出既具有較高特異性(焓變貢獻為主)、且具有較好的透膜性 (熵變貢獻為主) 的藥物分子 (熵焓平衡設(shè)計) 。

圖1：HIV-蛋白酶抑制劑的研發(fā)過程

圖2：第二代他汀類藥物（Statins）

篩選和交互驗證結(jié)合特異性

表觀遺傳學(xué)中的組蛋白marker研究，通過ITC實驗，用具有不同甲基化修飾以及序列的組蛋白肽段marker (下圖中由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4）滴定蛋白TAF3 PHD結(jié)構(gòu)域，從而確認(rèn)特異性結(jié)合的組蛋白marker。

圖3：由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4

酶學(xué)動力學(xué)研究

Microcal ITC可以在無需對底物或產(chǎn)品進行任何修飾的情況下完成酶促動力學(xué)的研究，獲取Km, kcat和Ki等數(shù)據(jù)。采用ITC和分光光度計進行酶促動力學(xué)(PNPP-PP1-γ)的研究的對比。使用兩種不同技術(shù)獲得的酶促動力學(xué)速率參數(shù)吻合非常好。

圖4：不同技術(shù)獲得的酶促動力學(xué)速率參數(shù)吻合

全自動的Microcal PEAQ-ITC Automated將Microcal PEAQ-ITC的性能與全自動化運行相結(jié)合，實現(xiàn)自動化與智能化運作。相比手動版，自動版將分析效率提升7倍。全自動化實現(xiàn)加樣，清洗，樣品轉(zhuǎn)移，減少人員操作誤差，減少新手培訓(xùn)和指導(dǎo)時間，提升數(shù)據(jù)質(zhì)量和儀器使用效率。

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